Вступление Заболеваемость и смертность от злокачественных новообразований органов женской репродуктивной системы находится на одном уровне с этими показателями для рака молочной железы и составляет по данным национального канцер-реестра Украины, около 20 и 18% от всех онкологических заболеваний соответственно. Заболеваемость раком шейки, тела матки и яичников составляет соответственно 15,3, 18 и 11,5, а смертность – 5,5, 4,0 и 5,4 случаев на 100 тыс. женщин (Бюл. Нац. канцер-реєстра Украины, 2015: 1-53). При этом, данные показатели имеют тенденцию к росту. Высокой смертность также остается по причине того, что часто заболевание выявляется на поздних стадиях. Особенно это касается рака яичников, который диагностируется на III–IV стадии в 63,8% случаев. Но, даже рак шейки матки, для раннего выявления которого могут применяться эффективные скрининговые программы, выявляется в Украине на поздних стадиях в 22,4% случаев. Данная ситуация делает актуальным вопрос оптимизации лечения и индивидуального подбора терапии таких пациентов.

Генетическое тестирование наследственной предрасположенности к мультифакториальным заболеваниям   Расшифровка генома в 2006 г. явилась крупнейшим достижением науки, которое определило новый уровень развития медицины во всех областях исследований. Если генетика изучает отдельные гены и признаки (наследственность и изменчивость у человека на всех уровнях его организации – молекулярном, клеточном, организменном, популяционном), то пришедшая ей на смену геномика исследует структурно-функциональную организацию целого генома, т. е. весь наследственный аппарат клетки, ее ДНК.

Пока у больного есть дыхание, говорят, есть и надежда. Цицерон Помню первые мобильные телефоны – огромные, тяжелые и уродливые трубки… Сегодня мы выбираем смартфоны по вкусу и цвету… Нечто подобное происходит сейчас и в тканевой биоинженерии. Первый шаг в этом направлении тоже напоминает прародителя сотовых телефонов – мышка, под кожей спины которой растет человеческая ушная раковина. Тогда лабораторное животное было использовано как естественный «биореактор», который давал возможность стволовым клеткам приживаться и дифференцироваться на искусственном биополимерном каркасе (рис. 1)… Сегодня уже начаты эксперименты по изготовлению органов с помощью технологии 3D-печати – удалось создать почку, сердце и даже глаз. В хирургии и травматологии разрабатываются методики печати протезов на 3D-принтере, создающем сверхточную модель бедра, колена, локтя. «Чернилами» для такой печати служат стволовые клетки. Недалеко то время, когда у нас появится возможность ремонтировать себя бесконечное количество раз (рис. 2)… Конечно, пока такие разработки находятся на стадии эксперимента, но труд десятков тысяч ученых всего мира не может не дать позитивных результатов, причем уже в обозримом будущем. Тема тканевой инженерии огромна, поэтому мы поговорим лишь о реперных точках, определяющих развитие регенеративной медицины на новом уровне. Начнем с репродукции человека. Нет, это не репродуктивное клонирование, а разработка новых технологий, позволяющих бесплодному мужчине стать биологическим отцом, а женщине – матерью. Сперма Карим Найерния из университета Ньюкасла разработал технологию создания полноценных сперматозоидов из стволовых клеток кожи и костного мозга. В 2006 году в его лаборатории с помощью этого метода родились первые мышата. Яичники Группа Терезы Вудрафф в Институте исследования женского здоровья создала на 3D-принтере «биопротезный яичник»: специалисты разработали специальный каркас из гидрогеля, в котором были сделаны небольшие отверстия для размещения фолликулов, а также структуры, стимулирующие рост кровеносных сосудов. Затем такие яичники были засеяны фолликулами и трансплантированы самкам мышей, собственные яичники которых были удалены. После спаривания эти подопытные мыши принесли полноценное потомство. Кровь Не меньшее внимание уделяется и проблемам крови. В 2012 году специалисты из Гарвардского университета (Бостон, США) разработали способ превращения стволовых клеток в заготовки клеток крови. По словам руководителя исследовательской группы Райохиши Сугимура, эта технология поможет тем, кто нуждается в срочном переливании крови редких групп. Кожа Французским ученым на основе технологий тканевой биоинженерии удалось вырастить из стволовых клеток человеческую кожу, необходимую при лечении пострадавших от ожогов. Группу ученых возглавляет Марк Песшански, директор французского Института исследования стволовых клеток. Коллектив под его руководством разработал технологию на основе первоначального получения из стволовых клеток кератиноцитов. Затем на их основе выращивается полноценная кожа, имеющая роговой слой. Как показали проведенные опыты, такая искусственно выращенная кожа человека полностью соответствует по своим характеристикам его естественной коже. На завершающей части исследования, проведенного совместно с испанскими учеными, была отработана методика пересадки искусственной кожи.   Мышцы Группа профессора Брэдли Олвина трансплантировала стволовые клетки-предшественницы мышечной ткани мышке-реципиенту, у которой были повреждены мышцы конечностей. Результаты исследования показали, что мышечные стволовые клетки не только восстанавливают поврежденную мышцу, но и удваивают ее массу. Результаты сохраняются в течение всей жизни мыши-реципиента. «Мы ожидали, что стволовые клетки после трансплантации увеличат свою популяцию, восстановят поврежденную мышечную ткань, а затем погибнут. Но наши предположения не оправдались» – комментирует эксперимент профессор Олвин. – «Введенные стволовые клетки постоянно делились, снижая скорость старения мышцы после трансплантации, а также сохраняли мышечную силу и массу. До оценки результатов эксперимента мы считали, что увеличенная мышечная масса поврежденной конечности мыши-реципиента вернется к первоначальным значениям в течение нескольких месяцев. Вместо этого мышечная масса поврежденной конечности увеличилась на 50%, а ее объем возрос на 170%. Эти изменения сохранились до конца жизни мыши-реципиента, продолжавшейся около двух лет». Кости Компания Epi Bone разработала новую технологию трансплантации костей – их выращивают из стволовых клеток самого пациента. Cначала проводят компьютерную томографию поврежденного участка для вычисления и конструирования персонализированного трехмерного каркаса, а затем берут у больного образец жировой ткани, откуда извлекают стволовые клетки и внедряют их в уже сделанный каркас. После чего матрица, заселенная клетками, помещается в биореактор. Через три недели формируется живая человеческая кость, имеющая размеры и форму, необходимые для пациента. Тимус Исследователи из университета Эдинбурга непосредственно в организме подопытной мыши вырастили тимус. Это центральный орган иммунной системы, расположенный за грудиной, в котором созревают T-клетки иммунной системы. У эмбриона мыши были взяты фибробласты – клетки соединительной ткани. С помощью генной инженерии они были перепрограммированы в клетки тимуса и вместе с другими ключевыми клетками этого органа пересажены мыши. Из этих клеток вырос полностью идентичный настоящему и функционирующий тимус. Создание перечисленных выше тканей особых трудностей не вызывает, и часть из этих технологий перешагнула этап эксперимента и применяется в клинике уже сегодня. Гораздо сложнее создать орган, полностью воспроизведя при этом все его клеточное многообразие, а самое главное – его функции. В этом направлении разрабатывается несколько биотехнологических подходов. Для начала вернемся к мышке с человеческим «ухом». Соавтор этой технологии Линда Гриффит — профессор биоинженерии и механической инженерии Масачуссетского технологического института (в 2006 году получила стипендию Мак-Артура – «грант для гениев») – сегодня развивает технологии культивации 3D-культур клеток печени в биореакторе, а также участвует в проекте «Человек на чипе». Еще один соавтор «ушной технологии» Чарльз Ваканти — профессор медицинской школы Гарварда – вырастил первую искусственную кость нужной анатомической формы для пациента с травмой большого пальца. Технологии, разработанные Линдой Гриффит и Чарльзом Ваканти, сейчас применяются для создания искусственных органов со сложной структурой. Сначала формируется каркас из биодеградирующего полимера, который затем заселяется клетками. После распада каркаса остаются только клетки, сохраняющие его форму. Это своего рода попытка симулировать работу гомеобокс-генов, отвечающих за формообразование органов в период внутриутробного развития. Второй подход заключается в использовании вместо биополимера соединительнотканного матрикса органа. Клетки донорского органа уничтожаются, а полученный матрикс заселяют клетками реципиента. Заселение каркаса должно происходить в условиях, максимально приближенных к условиям внутри организма – с оптимальной температурой и снабжением питательными веществами всех его частей. Такие технологии успешно разрабатываются в Краснодарском Международном научно-исследовательском клинико-образовательном центре регенеративной медицины под руководством профессора Елены Губаревой. Центр проводит исследования, направленные на изучение регенерации внутригрудных органов и тканей. Ученые уже успешно пересаживают лабораторным животным органы планарной (плоской) пространственной организации, типа диафрагмы, созданные в биореакторе. Кроме того, получены бесклеточные каркасы сердца и легких, причем, без разрушения внеклеточного матрикса. Процесс децеллюляризации происходит в биореакторе под воздействием ферментов и растворов детергентов различной концентрации. Они разрушают клеточную мембрану, и остаются только компоненты внеклеточного матрикса. В итоге орган при сохранении трехмерной формы, становится полностью бесклеточным и состоит из коллагенов, эластина, фибронектина и других компонентов внеклеточного матрикса, который затем заселяется клетками реципиента (рис. 3). Испанские ученые представили новый метод создания искусственных органов для трансплантации с использованием матриц от органов животного происхождения, то есть ксенотрансплантации, который позволит значительно снизить риск отторжения пересаженного органа. Метод заключается в очистке от клеток животного пересаживаемых органов с последующей заселением оставшегося внеклеточного матрикса стволовыми клетками пациента. Франсиско Фернандес-Авилес, главный кардиолог больницы Грегорио Мараньона в Мадриде, считает это новым этапом в развитии ксенотрансплантации. Наши знания в области тканевой биоинженерии накапливаются и постепенно переходят в умение… В 2008 году были опубликованы результаты работы по воспроизведению первых этапов развития человеческого мозга. В 2011 году японские исследователи получили зачатки гипофиза и глазных бокалов. Пока речь идет только о выращивании мини-органоидов, потому что дальнейшие этапы их развития требуют сложного трехмерного окружения, которое, в свою очередь, тоже должно развиваться с ростом органа. В последующие годы ученым разных групп удалось получить мини-органоиды кишечника, желудка и почек. Последнее достижение в этой области – органоиды сердца – принадлежит известному специалисту по созданию искусственных органов Энтони Атала – директору института регенеративной медицины Уэйк Форрест, который разработал технологии получения из стволовых клеток пациентов мочевого пузыря, уретры и влагалища. Сейчас во всем мире живут десятки людей с такими искусственными органами. В 2005–2009 годах четырем девочкам с редкими патологиями, при которых половая система развивается неправильно, были пересажены искусственные влагалища. В 2014 году подросшие пациентки смогли жить нормальной половой жизнью. Уретру (мочеиспускательный канал) вживили пяти мальчикам, и операции также прошли успешно, без осложнений. Кроме того, был разработан метод 3D-печати прототипа искусственной почки. Искусственная почка имела правильную форму, однако внутренняя структура прототипа даже близко не приближалась к сложности настоящего органа, которая совершенно необходима, чтобы почка выполняла свою функцию. Тем не менее, именно метод биопечати со временем позволит получать необходимые биологические микроструктуры органов. Это направление активно развивает еще один знаменитый биоинженер – Габор Форгач. Под его руководством был создан первый коммерческий 3D-биопринтер, на котором уже напечатаны образцы многих тканей. Этот прибор под названием «Organovo» удалось создать в 2009 году. А уже в 2010 году на первом биопринтере напечатали человеческий сосуд, причем без каких-либо дополнительных каркасов. Чтобы сделать из клеток аналог чернил принтера, их помещают в специальный гель, который не позволяет стволовым клеткам «слипаться» раньше времени. Принтер печатает, как правило, не единичными клетками, а их шарообразными скоплениями – сфероидами (хотя метод позволяет использовать для печати иотдельные клетки, что необходимо для некоторых структур). Каждый напечатанный слой клеток отделяют слоем геля, а уже готовый орган отправляют дозревать в биореактор. При этом гель, использованный для печати, растворяется, а внутри органа развивается его сосудистая сеть. 3D-биопечать продолжает развиваться во всем мире: в том же 2010 году впервые удалось напечатать фрагмент кожи, а в 2014 – сердечный клапан и фрагмент ткани печени. Среди последних достижений следует отметить создание на биопринтере нервной ткани человека с точно позиционированными нейронами, что удалось сделать группе ученых под руководством австралийского биоинженера Гордона Уэлласа (это и есть тот самый случай, когда необходимо печатать ткань отдельными клетками, а не сфероидами). И еще одно направление биоинженерии – органы на чипах. Его развивает Дональд Ингбер – автор идеи «органа на чипе» – простейшей клеточной системы, расположенной на пластинке стандартного размера и воспроизводящей основные функции моделируемого органа. Дональд Ингбер создал множество органов на чипах, и сейчас работает над объединением десяти таких органов в «человека на чипе». Орган на чипе представляет собой пластину с ячейками, заселенными клетками разных видов. Ячейки соединяются каналами, имитирующими кровоток или обмен тканевой жидкости между группами клеток «органа». Такое устройство в максимально компактной и контролируемой форме моделирует саму суть работы органа. На чипах уже удалось воспроизвести работу легких, почек, печени, кишечника с его микробиомом и перистальтикой, а также гематоэнцефалического барьера и гематопоэтической ниши костного мозга. Сейчас исследователи работают над созданием «человека на чипе» – то есть системы из всех жизненно важных органов, которая позволит изучить транспорт веществ в организме, а также влияние органов друг на друга. Не остаются без внимания и проблемы косметологии. Группа ученых под руководством Такаси Цудзи из Научного университета Токио использовала стволовые клетки для создания волосяных фолликулов. Они вырастили «зародыши» волосяных луковиц, которые можно вживить в кожу. Биотехнологи использовали взрослые стволовые клетки, извлеченные из здоровых волосяных луковиц пациента, что исключает возможность развития реакции отторжения трансплантата. Очевидно, что главная проблема тканевой и органной инженерии, которую еще предстоит решить, это создание высокоспециализированных клеток, упакованных биопринтером в оптимальную для функции органа пространственную структуру. Небольшой вклад в это общее дело вносит и наша лаборатория. Используя стволовые клетки из разных источников (табл. 1), мы пытаемся сделать их высокоспециализированными (табл. 2), применяя технологии направленной дифференцировки…

«Люк, я твій батько і твоя мама. Люк, я заплутався у термінах» На обрії з’являються дивовижні дослідження у галузі репродуктивних технологій. Хоча стосовно того, про що йтиметься далі, світанок був у 2000–2010 роках, зараз вже, мабуть, близько до зеніту. А йтиметься про можливість отримання потомства з генетичним матеріалом від двох батьків-чоловіків, двох матерів або ж навіть самозапліднення. Ці технології відкриють новий підхід до лікування неплідності, а також дозволять одностатевим парам мати генетично спільне потомство, а якщо зайти далі від всепроникаючого антропоцентризму, то це й нові можливості для збереження видів вимираючих тварин, наприклад, коли в природі не лишилося особин певної статі, або наявна лише одна особина. Чи можна створити гамети in vitro? На шляху дослідників, що намагалися вирішити проблему створення гамет in vitro, довго стояла перешкода під назвою «геномний імпринтинг». Це явище пов’язане з епігенетичними чинниками, за умов якого певні гени експресуються по різному в залежності від їх походження – від батька або від матері. Відомими захворюваннями, пов’язаними з генетичним імпринтингом, є синдром Ангельмана і синдром Прадера–Віллі. При цих захворюваннях спостерігається делеція ділянки хромосоми 15q11-13, але, якщо вражена батьківська хромосома, то у дитини розвивається синдром Прадера–Віллі (гіпотонія, ожиріння, гіпогонадизм), а якщо материнська – то синдром Ангельмана (епілепсія, тремор, «усміхнений» вираз обличчя).     Ще 1984 року дослідження зі створенням ембріону з пронуклеусами особин однієї статі показало, що плід гине на стадії бластоцисти [1]. Це вказувало на важливість процесу сперматогенезу у чоловіків і оогенезу у жінок. Довгий час ці чинники були невідомі, а їх відтворення in vitro не уявлялося можливим. Тепер відомо, що гамети отримують певні епігенетичні чинники (описано близько 80 генів, епігенетичні модифікації яких пов’язані з геномним імпринтингом) під час цих процесів, що й забезпечує нормальний розвиток після запліднення. Обхідний шлях Є інші шляхи для створення правильного епігенетичного коду гамет, окрім його штучного відтворення in vitro. Наприклад, у 2011 році в журналі «Biology of reproduction» з’явилася робота, у ході якої дослідникам вдалося відтворити у мишей потомство з генетичним матеріалом від двох мишей чоловічої статі [2]. Для цього була розроблена досить складна технологія. Для початку з міофібробластів треба було зробити індуковані плюрипотентні стовбурові клітини (іПСК). Створення іПСК – це технологія, що дозволяє за допомогою індукції певних генів (Oct3/4, Sox2, c-Myc, та Klf4) і культивування в умовах, потрібних для стовбурових клітин, повернути дифференційовані клітини в стан плюрипотентності [3]. Після отримання індукованих стовбурових клітин автори використали вже відомий факт, що в культурі стовбурових клітин приблизно 1% клітин спонтанно втрачають 1 статеву Y-хромосому, набуваючи каріотипу 45Х0. Хоча у людей такий каріотип призводить до смерті ще на ембріональному періоді, а в рідкісних випадках до народження дитини з синдромом Шерешевського–Тернера, однією з ознак якого є неплідність, у мишей даний каріотип призводить до розвитку життєздатної особини жіночої статі з нормальною репродуктивною функцією. Після появи в культурі іПСК 45Х0 їх використовували для ін’єкції у бластоцисту нормальної лінії мишей, таким чином створюючи мишей-химер жіночої статі. Наявність клітин, що походили з 45Х0 іПСК підсажених клітин підтверджувалась так: 45Х0 клітини мали ген Agouti, наявність якого забезпечує специфічне забарвлення хутра, а також Pou5f1-GFP – трансген, що кодує білок з флуоресцентною міткою. Відповідно, якщо в миші було наявне хутро такого забарвлення та клітини, що містили флуоресцентну мітку, то вона походила з клітин 45Х0. Відповідно, ці миші мають і яйцеклітини, що походять із попередників іПСК 45Х0. Далі химер (з клітинами від батька №1) схрещували зі звичайними мишами тої ж лінії чоловічої статі (батько №2) і отримували потомство з генетичним матеріалом від двох батьків-чоловіків. Нащадки були як чоловічої – 46ХУ(Х від батька №1 та Y від батька №1), так і жіночої статі 46ХХ та 46Х0 (Х або 0 від батька №1 та Х від батька №2), усі мали Агуті-забарвлення й Pou5f1-GFP+ клітини. Таким заплутаним методом і отримали потомство з генетичним матеріалом від двох батьків-чоловіків, створивши по дорозі новий спосіб розмноження (рис. 1). Сьогодення Для клітинної біології та генетики наших днів кожен рік – це вічність і тисячі нових досліджень, і гаметогенез in vitro перестав бути чимось недосяжним. Вже є результати успішного відтворення потомства з використанням штучно індукованих яйцеклітин у мишей. Автори роботи, нещодавно опублікованої в журналі «Nature», створили протокол для проведення повного циклу диференціації жіночих статевих клітин з плюрипотентних стовбурових (ембріонального походження та іПСК) до яйцеклітин, з яких вдалося отримати здорове потомство, а також після запліднення яких вдалося відібрати з бластоцисти ембріональні стовбурові клітини і провести наступний цикл з відтворенням потомства [4]. Систему, що слугувала середовищем для розвитку яйцеклітин, дослідники назвали rOvary (reconstituted ovary). Скаладалась вона з примордіальних гермінативних клітин (ПГК), попередників гаметогенезу, які були диференційовані з іПСК (що походили як з ембріональних міофібробластів, так і з фібробластів дорослих особин) або з ембріональних стовбурових клітин (ЕСК), а також суміші соматичних клітин яєчників мишей і специфічного культурального середовища. Розвиток гамет в чашці Петрі умовно був розділений на 3 етапи: 1) диференціація in vitro, 2) ріст in vitro 3) дозрівання in vitro. Дослідники намагалися імітувати фізіологічні етапи гаметогенезу, на кожному етапі модифікуючи середовище і контролюючи стан клітин. На 3 день культивування в культурі з’явилися фолікулоподібні структури, а експресія Blimp1 (BV) підвищилася, що відображає природний розвиток ПГК. Ще через 2 тижні, коли маркер BV зник, з’явився маркер яйцеклітин stella (SC). Імуногістохімічне дослідження підтвердило нормальний перебіг мейозу, за винятком підвищення частоти порушення коньюгації. Вся перша частина займала приблизно 3 тижні, наприкінці якої був сформований ооцит І порядку. В другій частині до культури додавалися середовище, збагачене фолікулостимулюючим гормоном (ФСГ), і через 11 днів змінювали умови і переходили до 3 частини, під час якої приблизно у 30% ооцитів спостерігалося відходження першого полярного тільця. Фенотипово ооцити, вирощені в чашці, мало відрізнялися від вирощених in vivo як за морфологією, так і за розподілом епігенетичних міток на маркерних генах (H19 та Igf2r) (рис. 2). Для детального порівняння розвитку ооцитів in vitro та in vivo, проводилося динамічне дослідження транскриптому з використанням технології секвенування РНК. Такий вид дослідження показує детальний профіль всіх генів, що експресуються на даному етапі. Ці дані дозволять порівняти розвиток ооцитів in vitro та in vivo, що допоможе вдосконалити технологію. Крім того, таким чином створюється нова модель для дослідження гаметогенезу. Для остаточного підтвердження нового методу ооцити були запліднені за допомогою IVF (in vitro fertilization), та з використанням сурогатної матері отримано потомство як чоловічої, так і жіночої статі. Хоча при цьому спостерігалося підвищення частоти зупинки розвитку ембріона, більшість особин у потомстві не відрізнялися від мишей дикого типу і в подальшому були здатні до репродукції. У лютому 2018 року лабораторія Единбурзького університету заявила, що їм вдалося провести подібну диференціацію in vitro і з людськими оогоніями, проте на час публікації цієї статті опис дослідження є недоступним. Робота японських біологів розвитку відкриває потенційну можливість отримати «етично чисті» яйцеклітини прямо з соматичних клітин. Втім, ще один короткий етап поки лишається нездоланним: для початку розвитку ооцитів все одно потрібні клітини яєчника. Щодо сперматогенезу, то у цьому напрямку таких карколомних результатів ще не отримано, хоча є роботи, що in vitro доводили примордіальні гермінативні клітини до фенотипу сперматогонієподібних клітин, частина з яких була здатна до мейозу та утворення гаплоїдних клітин [5]. Поки чоловічий бік питання ще не вирішений, можна продовжити спекулювати на тему майбутьного репродуктивних технологій, і хоча штучна диференціація гамет теоретично можлива навіть за сучасного стану речей, беручи до уваги експерименти з химерами, до майбутнього з конвеєрами зі створення людей, описаного Олдосом Гакслі у своїй антиутопії «О дивний світ новий», не вистачає ще багатьох складових, наприклад, штучної матки (про яку ми писали в одному з попередніх номерів журналу). Повний перелік літератури знаходиться у редакції.  

Толерантность (от лат. tolerantia  — терпение, терпеливость, принятие, добровольное перенесение страданий) — социологический термин, обозначающий терпимость к иному мировоззрению, образу жизни, поведению и обычаям. Иммунологическая толерантность — состояние организма, при котором иммунная система устойчиво воспринимает чужеродный антиген как собственный, и не отвечает на него. (Википедия)   Для продолжения темы использования фетальных клеток в реге­неративной медицине необходимо вспомнить об иммунологической толе­рантности. Я бы добавил в ее определение, приведенное выше, «функционально полноценная иммунная система», так как трансплантированные чужеродные органы приживаются и работают в организме реципиента, как свои собственные, но на фоне угнетения иммунной системы иммунодепрессивными препаратами. В этом случае толерантности как таковой, нет, есть блокада клеточного звена трансплантационного иммунитета. Это крайне важно понимать, так как фетальные клетки, используемые в регенеративной медицине, всегда чужеродные! А это значит, что они неизбежно отторгаются, и длительного существенного лечебного эффекта дать не могут. Отторжение органа достаточно легко контролировать, как и потерю его функциональной активности. Но при трансплантации стволовых клеток реакция отторжения трансплантата протекает абсолютно незаметно, без каких-либо внешних признаков, кроме одного – отсутствия позитивного клинического результата от их введения. Как много было восторга от первых результатов лечения болезни Паркинсона и рассеянного склероза с помощью фетальных дофаминергических нейронов и олигодендроцитов! Пациенты вставали из кресел-каталок, самостоятельно ходили и даже ездили на велосипеде! Шесть месяцев… А после этого срока неизбежно наступала катастрофа отторжения пересаженных клеток, да еще и с коллатеральным повреждением окружающей «здоровой» нервной ткани. Клинически это проявлялось в резком ухудшении состояния пациента, вплоть до полной утраты мышечной функции. Все спекуляции на тему об якобы неиммуногенности фетальных клеток, по той причине, что на их поверхности очень мало молекул, определяющих иммунологическую чужеродность (HLA-молекулы главного комплекса гистосовместимости), оказались несостоятельными. И в дальнейшем, в процессе лечения тех заболеваний, при которых быстрое нарастание тяжести заболевания после клеточной терапии легко манифестирует (почечная недостаточность, цирроз печени, спинальная травма, пигментная дистрофия сетчатки, сахарный диабет 1 типа), факт отторжения аллогенных стволовых клеток был неоднократно подтвержден. Трансплантация аллогенных стволовых клеток, в том числе и фетальных, вернулась к состоянию начала трансплантации органов, которые тогда, при пересадках до разработки иммуносупрессантов, неизбежно отторгались… Так какой же выход из данной ситуации? Есть два пути решения проблемы отторжения клеточного трансплантата. Первый, и хорошо уже известный в трансплантации органов, заключается в применении препаратов, угнетающих функцию иммунной системы. Сегодня в этой области наиболее активно работают шведы, в частности, профессор Патрик Брюндин, группа которого оптимизирует схемы фармакологической иммунодепрессии при лечении аллогенными стволовыми клетками пациентов с болезнью Паркинсона. Успехи есть, но вместе с улучшением состояния больного приходят и осложнения, связанные с угнетением функции иммунной системы… Второй путь – это индукция централь­ной иммунологической толерантности, о которой мы сообщали еще в 2003 году. Суть данного подхода заключается в том, что введенные в больших дозах фетальные клетки индуцируют толерантность к самим себе, приживаясь в центральных органах иммунной системы (тимус, костный мозг), что обеспечивает их участие в механизмах формирования иммунологической толерантности в организме реципиента (Kukharchuk O. L. “Method of mammal’s organism antigenic ho­meostasis control system reinstallation by technology of Kukharchuk–Radchenko–Sirman”. Patent for Ukraine Invention № UA 72310. Bull. №2. – 2005 / V. V. Radchenko, V. M. Sirman). Не вдаваясь в научные подробности, приведу иллюстрацию наших экспериментов на лабораторных животных (Фото 1, 2). На фотографиях достаточно хорошо видно, что аллогенная селезенка под «прикрытием» больших доз фетальных стволовых/прогениторных клеток прорастает сосудами и приживается в сальнике белой крысы, тогда как в контроле видна мощнейшая реакция отторжения с полным разрушением трансплантата... Сегодня мы успешно используем эту технологию для лечения больных. А тогда, в 2003 году, за это открытие научный бомонд Украины обвинял нас во всех смертных грехах… Кто-то еще использует такой подход для предупреждения отторжения трансплантата? Да, и с большим успехом! Группа ученых под руководством профессоров Татсуо Каваи и Бенедикта Косими (США) делает то же самое для пациентов с пересаженными почками… (Kawai T. et al. Long-Term Results in Recipients of Combined HLA-Mis­matched Kidney and Bone Marrow Transplantation Without Maintenance Immunosuppression. American Journal of Transplantation 2014; 14: 1599–1611). Только вместо фетальных клеток они используют стволовые клетки костного мозга, взятого у донора почки, – для индукции центральной иммунологической толерантности к пересаженному органу. Больные, которым трансплантировали почки по этой технологии, живут без применения дорогостоящих и небезопасных иммунодепрессантов уже более 10 лет (Фото 3).